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    安全是實驗前提 規范操作是實驗基礎

    發布時間:2021-3-12 18:55:51??????點擊:

      離心機在植物組織蛋白質提取中的應用講解.

      本文講解的提取方法是采用三氯醋酸—丙酮沉淀法,詳細步驟如下:

      1、在液氮中研磨葉片

      2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜,然后離心機離心(4℃8000rpm以上1小時)棄上清。

      3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%的β-巰基乙醇),搖勻后離心機離心(4℃8000rpm以上1小時),然后真空干燥沉淀,備用。

      4、上樣前加入裂解液,室溫放置30分鐘,使蛋白充分溶于裂解液中,然后離心機離心(15℃8000rpm以上1小時或更長時間以沒有沉淀為標準),可臨時保存在4℃待用。

      5、用Brandford法定量蛋白,然后可分裝放入-80℃備用。

      藥品:

      提取液:含10%TCA和0.07%的β-巰基乙醇的丙酮

      裂解液:2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中(終體積為5ml),使用前再加入1M的DTT65ul/ml。

      這種方法針對雙向電泳,雜質少,離子濃度小的特點!當然單向電泳也同樣適用,只是電泳的條帶會減少!

      注意在離心機的使用過程中,都必須遵循一些安全要求:

      轉鼓的強度計算應符合JB/T 8105使用范圍所界定的規定,其結構及各零、部件,必須有足夠的強度、剛度和穩定性。

      應保證在規定的工作條件下,運行安全可靠,并且操作維護方便,在操作人員遵守操作規程的條件下,安全防護裝置應確保人身的安全。

      在按規定條件制造、安裝、貯運和使用時,不得對人身安全構成威脅和造成傷害。

      離心機密閉防爆要求

      1)處于密閉、易燃、易爆環境或潮濕環境下工作的離心機,應符合密閉、防燃、防爆、防濕等有關標準或法規的要求。

      2)處于密閉、易燃、易爆環境或潮濕環境下工作的離心機,應有可靠的安全防護措施。

      上海盧湘儀離心機儀器有限公司作為經驗豐富的離心機廠家,在設計制造離心機以及培訓使用離心機的時候,嚴格按照以上要求執行!


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